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靶点-新药筛选

靶点-新药筛选

1.高通量测序结果的低通量表型验证
高通量测序可以检测到成百上千个差异基因,我们常规通过KEGG, GO分析后选定到某条感兴趣的通路后,面临着就是这条通路数十个基因的功能验证,常规的siRNA实验时存在不能完全去除基因的功能和表型停留时间短的困扰, CRISPR/ cas9KO载体可以解决这个困扰。
2.多基因的共转染
A.miRNA对靶基因调控的Rescue实验
B.转录因子调控下游基因的rescue实验

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3.CRISPR/cas9文库筛选基因的表型验证实验
通过CRISPR/cas9全基因组的敲除文库和激活文库进行筛选后,通过sgRNA的测序可能会检测到与筛选条件(如耐药, 放化疗敏感,自噬等)相关的数十个基因。使用电转将各个基因的敲除质粒或激活质粒转染到细胞中即可验证细胞表型。

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